參數規(guī)格:
產品名稱 |
FluA/FluB/pdmH1N1(HA)/H3N2(HA) 亞型流感病毒熒光PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R015201 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照) (1R,2S)-1-氨基-2-茚醇 質量規(guī)格:0.98(1R,2S)-(+)-cis-1-Amino-2-indanol
小鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-BOC-D-色氨醇質量規(guī)格:BR,>98%N-Boc-D-tryptophanol
MADB-106大鼠癌細胞 Breast cancer cells of MADB-106 rats 1640+10% FBSDL-苯甘氨醇 質量規(guī)格:>98%,BR2-Phenylglycinol
IL1RN Protein Human 重組人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)甘氨酸-L-亮氨酸 質量規(guī)格:0.98Glycyl-L-leucine
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚腎細胞)Amberlyst 15離子交換樹脂(干)質量規(guī)格:干Amberlyst 15 ion-exchange resin
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1D-基葡萄糖鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:25克
QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-884,4-二典聯(lián)本 4,4'-Diiodobiphqnyl3001/12/8
KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-D-谷酸shēng huà shì jì容量:25克
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養(yǎng)基,無酚紅 500mlpotewwiumchromate酸二鉀5克CP
人腎小管上皮細胞;HKC70700-30-0腺嘌呤1酸鹽;6-基嘌呤1酸鹽;維生素B4;1酸腺素Adenine phosphate;VitaMin B4
FluA/FluB/pdmH1N1(HA)/H3N2(HA) 亞型流感病毒熒光PCR檢測試劑盒CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2(±)-Carnitinexy7nochloride混旋肉堿鹽酸鹽1克AR,99%
NRK-52E,大鼠腎細胞 Sars蛋白表達株,293sars181A細胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞)鈷標準溶液 Cobclt 7440-48-4
人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B4pxenidone尼酮5毫克IND
BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) L-精酸100克
EB病毒轉化的人B細胞;KMYFAMPNa2 5g/25g/100g/500g原裝 Amresco 0634
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研