抗體的制備過(guò)程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有M Y原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量**時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. M Y血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. M Y血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 |
Anti-SRD5A1抗體 |
規(guī) 格 |
0.2ml/200μg |
貨號(hào) |
BJ-K95722 |
英文名稱 Anti-SRD5A1
中文名稱 類固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1)
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
別 名 3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1; SR type 1; Steroid 5-alpha-reductase 1; S5AR 1; S5A1_HUMAN.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SRD5A1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
對(duì)照/標(biāo)本無(wú)染色 產(chǎn)品僅用于科研
① 確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時(shí)間。
③ 對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測(cè)系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點(diǎn)是非常重要的。比如,如果一抗是兔來(lái)源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來(lái)匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
⑤ 檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標(biāo)記了酶或熒光素的抗體,現(xiàn)在大多數(shù)試劑公司的抗體均要求在4~8℃條件下保存,應(yīng)避免反復(fù)凍融,試劑保存時(shí)一定要避免與揮發(fā)性有機(jī)溶劑同放一室,以免降低抗體的效價(jià)。
⑥ 檢查標(biāo)本的儲(chǔ)存條件,好用已知陽(yáng)性的標(biāo)本來(lái)同時(shí)做陽(yáng)性對(duì)照。
⑦ 檢查色原/底物溶液,簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法是將一滴標(biāo)記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發(fā)生預(yù)期的顏色變化,則可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)用完,否則會(huì)失效。
⑧ 檢查沖洗液是否和反應(yīng)試劑匹配,溶液的pH值很重要,與過(guò)氧化物酶底物匹配的溶液中不應(yīng)含有疊氮鈉。
⑨ 檢查復(fù)染劑和封片劑是否和所使用的色原匹配。
弱陽(yáng)性
如果陰性對(duì)照沒(méi)有染色而陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)本弱陽(yáng)性,除了考慮上述因素外,還應(yīng)考慮:
① 標(biāo)本的固定方式,不當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r(shí)溫度過(guò)高,都會(huì)影響到所檢測(cè)的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。
② 不適當(dāng)?shù)目乖迯?fù)方式,由于石蠟切片在制作的過(guò)程中固定劑對(duì)抗原的封閉作用,必須用抗原熱修復(fù)或酶消化或兩種同時(shí)使用的抗原雙暴露法,至于使用哪一種方法,應(yīng)參照**廠家的說(shuō)明,同時(shí)結(jié)合標(biāo)本的具體情況而定。
③ 抗體的稀釋度是否過(guò)高或者孵育的溫度/時(shí)間是否正確。一般試劑**廠家都會(huì)對(duì)試劑給出一定的使用范圍,但是由于使用者的標(biāo)本來(lái)自各種組織,處理過(guò)程也不盡相同,所以應(yīng)參照使用范圍,對(duì)所使用的一抗進(jìn)行梯度測(cè)試,找出佳的使用濃度。
④ 切片上了過(guò)多的沖洗液,當(dāng)抗體加至切片上時(shí),等于人為地對(duì)抗體進(jìn)行了進(jìn)一步的稀釋。
⑤ 孵育時(shí)切片是否放置水平,否則會(huì)導(dǎo)致抗體流失。
如果陰性對(duì)照沒(méi)有反應(yīng),陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)良好,而標(biāo)本弱陽(yáng)性,則可能是由于陽(yáng)性對(duì)照不是同一種咨詢組織、或固定方式不同等原因所致。
anti-RARRES1/TIG1/FITC 熒光素標(biāo)記視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格:
生長(zhǎng)抑素受體2抗體 Anti-SSTR2 0.2ml
SYTL5 英文名稱: 突觸樣蛋白5亞型2抗體 0.1ml
Eukaryotic aspartyl protease 英文名稱: 天冬酸蛋白酶家族蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP3K7IP1(Ser423) 0酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格:
Anti-p-PKC/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化蛋白激酶C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Guinea IgM (親和化) 豚鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 Anti-HGF 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG 兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 1mg
FAM98A 英文名稱: FAM98A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPA32/RPA2(Thr21) 0酸化復(fù)制因子A蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
Guinea IgM (親和化) 豚鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-SRD5A1抗體小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISAKit ELISA. 96T/48T Bathophenanthroline 1662-01-7 中文名:紅菲繞啉 分子式:C24H16N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Baclofen 1134-47-0 中文名:巴氯芬 分子式:C10H12ClNO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠16α羥基雌elisa試劑盒 小鼠16α羥基雌試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠16α羥基雌試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠16α羥基雌試劑盒、小鼠16α羥基雌elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Buergerinin G 中文名: 分子式:C9H12O4
小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Azithromycin dihydrate 中文名:阿奇霉素二水物 分子式:C38H72N2O12
小鼠16α羥基雌1(16-αOHE-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estradiol heptanoate 4956-37-0 中文名:庚酸雌二醇 分子式:C25H36O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: