細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
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產品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
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Mouse podocyte；小鼠腎足細胞 |
貼壁生長 |
BJ-01X85237 |
細胞名稱 Mouse podocyte；小鼠腎足細胞產品僅用于科研
形態(tài)特性 多邊
生長特性 貼壁生長
特征特性 利用穩(wěn)定敏感的SV40T轉染建立的條件性永生化的腎足細胞；33℃/干擾素存在條件下，細胞增殖；37℃培養(yǎng)6天以上，細胞分化；表達WT-1，對緩激肽有反應。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；r-IFN(r-干擾素)
傳代方法 1:3傳代；2~3天換液1次。
傳代情況 P24
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務流程：
HIC(小腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2膽酸Cholic acid質量規(guī)格：≥98%,BR，無水
ACE2 Others
Human ACE2 / ACEH 細胞裂解液 (陽性對照) 膽酸(標準品)Cholic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
口腔角質細胞HOK黨參炔苷（標準品）Lobetyolin質量規(guī)格：僅供鑒別用
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) HA 細胞裂解液 (陽性對照) α-倒捻子素(標準品)α-mangostin質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品
KMB17 胚肺成纖維細胞地奧司明(標準品)Diosimin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品5-硝基吲哚(>98.0%(GC)) 5-Nitroindole 質量規(guī)格：>98.0%(GC) Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋁酞菁(>98.0%(T)) Phthalocyanine Chloroaluminum 質量規(guī)格：>98.0%(T) 小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒
酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine (purified by
sublimation) 質量規(guī)格：>98.0%(T) Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
酞菁(>93.0%(N)) Phthalocyanine 質量規(guī)格：>93.0%(N)
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
顏料藍15,酞菁藍B Pigment Blue 15 質量規(guī)格： HumanarylsulfataseA,ASAELISA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
顏料綠 7
Pigment Green 7 質量規(guī)格：
植物源性食品開心果(Pistachio)試劑盒20
酞菁鉛(II)(>95.0%(T)) Lead(II) Phthalocyanine 質量規(guī)格：>95.0%(T)
HumahymosinELISAKit人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酞菁鋅(>95.0%(T)) Zinc Phthalocyanine 質量規(guī)格：>95.0%(T) 小鼠低氧誘導因子2α(HIF2α)ELISA試劑盒 ，英文名： HIF2α ELISA Kit
酞菁鐵(II)(>95.0%(T)) Iron(II) Phthalocyanine 質量規(guī)格：>95.0%(T) 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA檢測試劑盒HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit
96T/48T
酞菁二鈉 Di Phthalocyanine 質量規(guī)格： 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CCL20, CKb4, LARC, MIP3A, SCYA20, ST38 Human MIP-3α(Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組MIP-3α濃度
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
Mouse podocyte；小鼠腎足細胞1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。