轉(zhuǎn)染方法的選擇介紹
我們熟知且常用的轉(zhuǎn)染方法主要有物理介導(dǎo),化學(xué)介導(dǎo),生物介導(dǎo)。
物理介導(dǎo)方法:電穿孔法、顯微注射和基因槍?zhuān)?/span>
化學(xué)介導(dǎo)方法:如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù);
生物介導(dǎo)方法:有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見(jiàn)的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。
但實(shí)驗(yàn)室使用較多的主要有化學(xué)介導(dǎo)中的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(質(zhì)粒轉(zhuǎn)染)和生物介導(dǎo)中的慢病毒轉(zhuǎn)染法。其中質(zhì)粒轉(zhuǎn)染操作簡(jiǎn)單,一般瞬時(shí)轉(zhuǎn)染選擇較多,但有些細(xì)胞系不容易轉(zhuǎn)染,因此選擇轉(zhuǎn)染方式時(shí)一定要做足功課,親身經(jīng)歷告訴我,千萬(wàn)不要圖方便,否則轉(zhuǎn)染效率簡(jiǎn)直崩潰。特別是養(yǎng)原代細(xì)胞的小伙伴,一點(diǎn)要認(rèn)真選擇!病毒轉(zhuǎn)染一般具有能夠穩(wěn)定表達(dá)的優(yōu)勢(shì),且其對(duì)原代細(xì)胞有較高的轉(zhuǎn)染效率,其中更分為慢病毒轉(zhuǎn)染,逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染和腺病毒轉(zhuǎn)染,其中腺病毒轉(zhuǎn)染可適合更為難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,例如懸浮細(xì)胞、T細(xì)胞、raw細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞。