細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
商品屬性：
|
產品名稱 |
生長特性 |
貨號 |
|
CHO-K1；中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆) |
貼壁生長 |
BJ-01X86316 |
細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)；CHO-K1
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1957年，Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞，CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯氨酸。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞STR鑒定服務流程：
N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine 中文名： 分子式：C10H11N3 度：98.0% 兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒
2-Hydroxyquinoxaline 中文名： 分子式：C8H6N2O 度：98.0% 兔子視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒
Sulfaquinoxaline 中文名：磺胺喹噁啉 分子式：C14H12N4O2S 度：98.0% 兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
Metamizole 中文名：安乃近 分子式：C13H16N3NaO4S 度：98.0% 兔子視黃醇結合蛋白4elisa試劑盒 兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子視黃醇結合蛋白4試劑盒、兔子視黃醇結合蛋白4eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
Valsartan 中文名：纈沙坦 分子式：C24H29N5O3 度：99.0% 兔子透明質酸elisa試劑盒 兔子透明質酸試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子透明質酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子透明質酸試劑盒、兔子透明質酸eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽
Ala-Gln 質量規(guī)格：>98%,BR
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4ELISA試劑盒小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-精氨酸甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質量規(guī)格：>99%,BR 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP-1β/CCL4 ELISA
Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide 質量規(guī)格：>98%,BR 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit
96T/48T
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 質量規(guī)格：>99%,BR 人催乳素釋放(PRH)試劑盒 Human
PRH ELISA Kit
1-芐基D-谷氨酸
1-Benzyl D-Glutamate 質量規(guī)格：0.98 RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
D-苯丙氨酸
D-Phenylalanine 質量規(guī)格：>99%,BR HIS釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒5
D-丙氨酸 D-Alanine 質量規(guī)格：>98%,BR
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒小鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
β-丙氨酸 β-Alanine 質量規(guī)格：>98% 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒 ，英文名： MIP1β ELISA
Kit
β-丙氨酸(標準品) β-Alanine 質量規(guī)格：>98%(T),標準品 人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA檢測試劑盒Humannicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit
96T/48T
D-色氨酸
D-Tryptophan 質量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血管**素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT氟蟲脲(標準品) Flufenoxuron 質量規(guī)格：分析標準品,98% 牛轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 Bovine ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
氟磺胺草醚(標準品) Fomesafen 質量規(guī)格：分析標準品,99.5% 牛轉化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒 Bovine ansforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit
氟酰胺(標準品) Flutolanil 質量規(guī)格：分析標準
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞產品僅用于科研
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
CHO-K1；中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆)采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。