注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。產品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱 |
豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒實驗步驟 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014783 |
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒實驗步驟組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區(qū)。
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISAKit Fumaric acid 110-17-8 中文名: 分子式:C4H4O4
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A 英文名稱: Mouse
Pulmonary surfacta associated protein type A 規(guī)格:
48T/96T 英文縮寫: SP-A Benzyl L-(+)-mandelate 62173-99-3 中文名:L-(+)-扁桃酸芐酯 分子式:C15H14O3
小鼠非肌性肌球蛋白重鏈9 英文名稱: nonMyosin
Heavy Chain 9 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: nonMYH9hc
Edaravone 89-25-8 中文名:依達拉奉 分子式:C10H10N2O
小鼠防御素A2 英文名稱: Mouse
Defensins A2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DA2
Dabigatran etexilate benzenesulfonate
1019206-65-5 中文名:苯磺酸達比加群酯 分子式:C40H47N7O8S 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠泛素蛋白elisa試劑盒 小鼠泛素蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠泛素蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠泛素蛋白試劑盒、小鼠泛素蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Cyproterone acetate 中文名:醋酸環(huán)丙氯地孕酮 分子式:C24H29ClO4
醋酸地塞米松
Dexamethasone Acetate 質量規(guī)格:>98%,BP,BR,可用于細胞培養(yǎng) 人谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit
醋酸地塞米松(標準品)
Dexamethasone Acetate 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲氧芐啶
Trimethoprim 質量規(guī)格:>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細胞培養(yǎng) ANNEXINV-FITC標記法細胞凋亡檢測試劑盒10/20
甲氧芐啶(標準品)
Trimethoprim 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
西維來司鈉
Sivelestat 質量規(guī)格:含量大于98.5% 小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 ,英文名: PLGF ELISA Kit
奈韋拉平
Nevirapine 質量規(guī)格:>99%,USP30,BR 小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAkit
96T/48T
奈韋拉平(標準品)
Nevirapine 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 Human GSH-Px ELISA Kit
磺胺甲惡唑
Sulfamethoxazole(SMZ) 質量規(guī)格:>99.5%,AR Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺甲惡唑(標準品)
Sulfamethoxazole(SMZ) 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品 APATHY封片液10毫升
硫酸頭孢匹羅 Cefpirome Sulfate 質量規(guī)格:>760μg/MG,BR MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羽葉白頭樹Garuga pinnata Reynorin 槲皮素-3-D-木糖甙 549-32-6 C20H18O11 ≥95%
蟾毒靈BufclinHPLC≥98%,20mg/支
(R型)人參皂苷Rg3 20(R)Ginsenoside Rg3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材地耳草121468-200401TLC法鑒別
Sweroside獐芽菜苷度:98%